767.锁定(2/3)

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而从多个维度描述TME。此外,还需要通过一系列体内和体外实验来验证结果。我们总结了使用scRNAseq研究的最新出版物B细胞受体(Bcellreceptor,BCR)是一种能识别并结合特异性抗原的膜免疫球蛋白,在B细胞的分化成熟过程中起着重要作用。BCR由两条重链和两条轻链组成,其中可变(V)、多样性(D)和连接(J)基因序列的重组创造了B细胞的多样性。这种多基因的复杂性使得鉴别不同的受体变得困难。然而,由于每个B细胞通常表达一个单一的受体,潜在的抗原特异性受体可以通过给定的原细胞链发现。BCR的两个主要功能如下。首先,它通过诱导B细胞激活过程中肌动蛋白骨架的实质改变和各种基因的表达来激活B细胞。其次,它介导抗原的鉴定和提取,从而导致加工过的肽在主要组织相容性复合体II(MHCII)上呈现给T辅助细胞。因此,BCR测序有助于进一步了解B细胞分化的轨迹及其特异性识别抗原性的机制,特别是当与单个B细胞的完整转录组身份配对时,这为了解癌症的发展提供了线索。更重要的是,BCR测序可以追踪来自单细胞的群体,揭示克隆型和表型之间的关系。ScRNAseq技术在BCR测序中具有天然优势,因为含有UMI的微流控系统可以保证同源VHVL配对的保存,而这些同源VHVL配对在B细胞批量测序中可能会丢失。BASIC是一个在单细胞分辨率上进行BCR测序的平台。作为重建配对全长BCR序列的工具,BraCeR为B细胞的克隆推断和谱系追踪提供了一个完整的管道。LIBRAseq是一种高通量的方法,将BCRse序列与其同源抗原特异性连接起来,可以用来绘制特定对象中数千个B细胞的抗原特异性。  

研究免疫球蛋白以探讨体液免疫的复杂性免疫球蛋白存在于肿瘤和血清中,在肿瘤中起双重作用。抗体通过其片段可结晶(Fc)支配功能,并受翻译后修饰调控。通常,免疫球蛋白是由骨髓和脾脏的浆细胞(PCs)分泌的。组织炎症区域和肿瘤内部的pc,特别是在三级淋巴结构(TLS)中,分泌肿瘤相关抗体并直接在肿瘤上诱导原位效应。在抗肿瘤功能方面,IgG是最重要的一类人免疫球蛋白,因为它能够结合巨噬细胞和自然杀伤细胞上的Fcy受体,并促进ADCC、ADCP和CDC的作用。此外,IgG对抗原处理和呈递至关重要,因为抗原呈递细胞(APCs)上的Fcy受体可以与IgG包被的免疫复合物结合,激活T细胞。抗体和抗体分泌细胞(APCs)的单细胞测序有助于进一步明确B细胞体液免疫的复杂网络。已经报道了一种单细胞液滴微流控测序方案,用于特异性结合靶细胞的抗体,这也适用于初级人类PC。CelliGO是一种液滴微流体系统,用于高通量单细胞筛选分泌IgG的原代细胞,一方面,通过基于荧光的液滴内单细胞生物测定检测IgG活性,另一方面,用barcoded反转录对配对的V基因进行测序。  

外周血未成熟B细胞通过高内皮静脉进入B淋巴滤泡。在B细胞滤泡中,naveB细胞(CD27)通过固有apc(包括DCs和滤泡树突状细胞(FDCs))接触抗原,之后激活BCR信号诱导抗原提取、内化和加工,将肽呈现在MHCII上。然后,B细胞迁移到与T细胞相邻的滤泡区边缘,将抗原呈递给滤泡辅助T(Tfh)细胞。因此,Tfh细胞刺激BCR,诱导naveB细胞分化,主要包括记忆B细胞(MBCs)、短命B细胞(shortlivedPCs)和生发中心(gernalcenter,GC)B细胞。这些不依赖GC的MBCs表达RGS13,可能增加GC抗性。此外,它们缺乏B细胞进入和离开GCs的CCR7和GPR183。为了分化为GCB细胞,它们首先进入GC的暗区(darkzone,DZ),在那里它们的膜表面免疫球蛋白通过体细胞高突变(sotichypertation,SHM)发生变化,称为亲和成熟。接下来,它们在亮区(LZ)经历一个竞争过程,在那里许多B细胞聚集,它们的命运取决于它们与Tfh细胞的相互作用,可能有能力捕获和呈现抗原,并发生类转换重组(CSR)。这个过程也依赖于Tfh细胞分化的结果,导致B细胞的结果。低亲和性B细胞成为长寿命MBCs,高亲和性B细胞成为PCs,其他细胞凋亡或重新进入Z进行SHM和克隆扩增。最近的研究表明,cMycLZB细胞亚群包括亲和力较高的PC前体或未来的DZ进入者,以及一些亲和力较低的MBC前体。值得注意的是,BCR在这个过程中起主要作用,B细胞分化的体液免疫过程中两个重要的检查点是naveB细胞和GCB细胞上的抗原提呈,这可能会提高体液免疫应答。此外,在单细胞水平上的完整转录组字符化将特别有助于确定naveB细胞向PC分化过程中的转录轨迹和异质性。  

B细胞分布不均一以往对B细胞的研究主要基于免疫组化或流式细胞术,限制了B细胞的清晰分类。Wouters等人回顾了69项研究,研究tilb在19种癌症中的预后意义,以探索B


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